Thành viên:ĐẶNG ĐÌNH BÁ

Bách khoa toàn thư mở Wikipedia

                  TẠO DÒNG VÀ TÁI TẠO DÒNG
 1.1 Khái niệm về tái tạo dòng(cloning)
        Nhìn chung, việc nguyên cứu phân tích ở mức phân tử các DNA, protein hay những thành phần khác của tế bào sinh vật thường gặp khó khăn về số lượng và độ tinh sạch của mẫu thí nghiệm. Để giải quyết vấn đề này, khi nghiên cứu hoạt động của gen,sự biểu hiện protein và cấu trúc phân tử protein, người ta chú trọng việc phân lập và thu nhận các gen quan tam(trường hợp nghiên cứu trên protein). Từ các gen thu gen in vitro nhằm thu nhận gen hay protein phục vụ cho mục đích nghiên cứu ban đầu.
       Tuy nhiên, bộ gen của vi sinh vật rất lớn và phức tạp. Thêm vào đó, trình tự gen chung ta quan tâm thường chỉ cí một hay hai bản sao trong mỗi tế bào. Vì vậy, chúng ta không thường để phân lập gen mục tiêu trên bộ gen. Nhằm giải quyết vấn đề này, người ta cần sử dụng các cấu trúc DNA có khả năng sao tự chép trong tế bào chủ làm phương tiện mang gen, biến nạp gen, tăng bản sao của gen, biểu hiện gen hay các thao tác trên gen khác. Các cấu trúc DNA dùng cho mục tiêu này được gọi là vector. Việc biến nạp DNA tái tổ hợp vào một tế bào thich hợp sẽ cho phép vector có khả năng tồn tại ổn định và tự sao chép độc lập với bộ gen của tế bào. tế bào có khả năng tiếp nhận vector  tái tổ hợp này được gọi là tế bào chủ(host cell). Tế bào chủ thường được chon lọc và cải tạo để tạo thành các chủng chủ(host strain) có kiểu gen và các đặc tính thuận lợi cho các thao tác trên gen. chủng chủ mang vector tái tổ hợp được gọi là dòng tái tổ hợp (recombinant clone). Dòng tái tổ hợpp được phân lập để lưu trữ DNA tais tổ hợp hoặc được dùng cho các thao tác  trên gen. Yoanf bộ quá trình nói trên được gọi là tạo dòng DNA hay DNA cloning.
   Như vậy, tạo dòng là bước cơ bản nhất của hầu hết các kỷ thuật gen. Mục đích của tạo dòng là nhằm thu được một số lượng lớn và tinh khiết các trình tự DNA xác định một cách dễ dàng hay nhằm một dòng tế bào có khả năng biểu hiện gen mục tiêu.